当标准治疗失败时，刺激体内干扰素产生的基因疗法可能被证明可有效对抗高风险的早期膀胱癌。

对于患有高风险的非肌肉浸润性膀胱癌（即Tis以及高度Ta和T1肿瘤）的患者，尽管使用卡介苗（BCG）进行了标准治疗，即所谓的“ BCG无反应性疾病”，但仍持续存在或复发治疗方案目前有限。由于发展成肌肉浸润性疾病的高风险，最安全的选择是膀胱切除术。然而，可以理解，许多患者不愿接受膀胱切除术。一种替代方法是二线药物治疗，但是唯一获得美国食品和药物管理局（FDA）批准的卡介苗无反应性药物缬沙比星仅能对8％的患者产生持久的完全反应。

“目前尚无有效的挽救疗法，可治疗BCG无反应，高风险，无肌肉浸润性膀胱癌的患者，这些患者可安全地延迟膀胱切除术或使患者远离膀胱切除术，”医学教授兼主席Colin Dinney医师表示德克萨斯大学医学博士安德森癌症中心泌尿外科。 “因此，我们和其他人正在开展研究，试图找到对患者安全的膀胱切除术替代品。”

在接下来的几年内，患者可能会有更有效的二线药物治疗选择：一种新型的腺病毒介导的基因疗法，可使膀胱内壁的细胞产生干扰素α-2b。

新疗法的漫漫长路

尽管干扰素α-2b是一种公认​​的抗癌药，但将干扰素滴入膀胱对膀胱癌的疗效有限，因为该药物可迅速从体内从尿中清除。相反，基因疗法会导致膀胱内壁的细胞产生干扰素，从而导致暴露时间延长。

包括泌尿生殖系统肿瘤和泌尿外科系教授Dinney博士和William Benedict博士在内的小组多年来一直致力于开发一种有效的膀胱癌基因疗法。研究人员期望膀胱肿瘤将成为基因治疗的理想靶点，因为含有该基因的载体可以轻松地滴入膀胱并在膀胱中保留几分钟，这将使载体与膀胱壁之间保持良好的接触，并实现良好的转移载体，基因活性良好。但是，研究人员发现，保护细菌免受感染的膀胱抗菌和抗病毒层也可以防止基因转移。

解决此问题的方法是Syn3，这是一种表面活性剂，可增强腺病毒载体转导膀胱壁细胞的能力。本尼迪克特博士在小鼠模型中进行的关键临床前研究表明，将基因载体与Syn3一起递送可导致肿瘤细胞和正常细胞有效吸收载体并产生干扰素。丹尼博士说：“膀胱就像一个生物反应器一样工作，可以产生干扰素，这种干扰持续了大约一周的时间。”

在临床前研究中，由Syn3促进的新基因疗法引起已建立的膀胱肿瘤明显缩小，并确定了三种作用机理。首先是直接的作用：掺入该基因的一些肿瘤细胞被产生的干扰素蛋白淹没，并因此死亡。第二，对干扰素敏感的肿瘤细胞（约占所有肿瘤细胞的20％至25％）经历了凋亡，因为它们长期暴露于膀胱中的干扰素。第三个也是最重要的是所谓的旁观者效应，其中排入尿液的蛋白质甚至对抵抗干扰素的肿瘤细胞也有效。正常的尿道上皮细胞尽管通过载体转导并产生干扰素，但并未因暴露于干扰素而受到伤害。

新的基因疗法是正在进行的研究领域的最新进展，其中许多研究得到了美国国家癌症研究所MD安德森的膀胱癌专业研究卓越计划（SPORE）资助。

早期临床试验显示出希望

基于有希望的临床前发现，来自多家机构的研究人员进行了重组腺病毒介导的基因干扰素α-2b联合Syn3的基因治疗I期临床试验，该治疗针对非肌肉浸润性膀胱癌患者进行了BCG治疗后复发。参加这项剂量递增试验的17名患者接受了一次膀胱内滴注基因载体和Syn3的基因载体，后者在膀胱中保留了1小时。在治疗后5天监测患者的不良反应，并在3个月时进行膀胱镜检查。在3个月时完全缓解的患者可以再接受1剂基因治疗。

在试验中观察到剂量限制性毒性作用。所有的不良反应均为1级或2级，最常见的不良反应是尿急，在所有情况下通过抗胆碱能药物的预处理可将其最小化。

除以最低剂量治疗的所有患者外，在治疗后长达10天的尿液中均可检测到α-2b干扰素，从而证实了有效的基因转移。尿液中干扰素的峰值水平与给药病毒颗粒的数量相对应。最令人兴奋的是，基因治疗后3个月的膀胱镜检查显示17例患者中有7例完全反应，其中13例患者中有6例接受了至少1 x 1010病毒颗粒/ mL的剂量治疗。

受到第一阶段试验结果的鼓舞，Dinney博士和其他人设计了一项行业赞助的多机构第二阶段试验。在该试验中，患有I级非肌浸润性膀胱癌的患者被随机分配接受Syn3加上I期试验中最高或第二高剂量的干扰素alfa-2b基因治疗载体的治疗（3 x 1011或1 x 1011病毒颗粒/ mL）。患者接受了最初的1小时膀胱内滴注疗法，表现出完全缓解的患者可以以相同的剂量水平每3个月接受多达3种其他治疗，总共4剂。该试用版于2012年11月启动，并在1年多的时间内完成了应计项目。

参加II期临床试验的40名患者中，有23例尽管进行了BCG治疗仍持续存在疾病，而17例通过BCG进行了无病治疗但随后又复发了。 5月在美国泌尿科协会的年会上报告了未经审核的中期结果，现在所有40名患者均可获得结果。

根据意向性治疗计算，从高度复发的自由度在6个月时为56％，在12个月时为35％，在两个剂量组中相似。研究还显示，仅9例乳头状（Ta或T1）病患者的12个月无复发生存率（55％）高于29例原位癌成分的患者（30％） 。与该治疗相关的不良事件只有三个：2级单纯性尿路感染，有腹泻史的患者中的3级腹泻病例和因尿液脱水导致的3级急性肾衰竭病例道感染。

正在进行更大的审判

由于II期临床试验的成功，Dinney博士和其他人目前正在与FDA合作，设计重组腺病毒介导的干扰素alfa-2b加Syn3的III期注册试验，用于BCG无反应的高危非糖尿病患者。肌肉浸润性膀胱癌。该试验定于2016年初开始，预计将在35个中心招募约100名患者。试用将具有两个非常规功能。首先，它将没有控制权，因为目前批准的二线药物疗法（缬卢比）的疗效相对较差。相反，所有患者都将接受基因治疗，并将结果与​​泌尿科肿瘤学家和FDA批准的基准进行比较。第二，该试验将包括原位癌患者和高度乳头状疾病患者的混合人群，FDA在先前的III期膀胱癌试验中不允许患者联合使用。

确定是否应批准新基因治疗的标准尚待确定。 Dinney博士预计该标准是12个月时至少25％的高级别无复发生存率。他说：“那将是有意义的，因为缬草素在3个月时的完全缓解率约为20％，而持久性缓解率约为8％。”

他计划的III期临床试验还将确定与新基因疗法反应相关的生物标志物。目前，泌尿科教授David McConkey博士和流行病学教授兼主席Wu Xifeng医师正在分析尿液和组织样本的预处理和后处理II期临床试验以识别潜在的生物标志物。 “我们在临床试验样本中正在寻找的可能的生物标志物之一是腺病毒干扰素是否引起尿液或肿瘤中TRAIL（一种细胞毒性细胞因子）的上调，或者可能二者兼有，以及尿液中TRAIL的水平或持续时间长短尿液中可检测到TRAIL与临床反应有关。”麦康基博士说。任何有希望的标志物都将在III期试验中进一步研究。

此外，麦康基博士实验室的工作表明，干扰素α上调人膀胱癌细胞中免疫介导的程序性细胞死亡配体1（PD-L1），因此将对治疗前后获得的样品进行分析以确定是否有变化在PD-L1或其结合伴侣的水平上，程序性细胞死亡1（PD-1）。麦康基博士说：“我们假设，如果将腺病毒干扰素与能阻断PD-L1或PD-1的抗体结合使用，可能会获得更好的临床活性，”麦康基博士说。

对于BCG无反应，高风险的非肌肉浸润性膀胱癌，确实存在对新疗法的需求未得到满足。” Dinney博士说。 “我们正在进行的研究可能会改变这一领域。”

有关更多信息，请致电713-563-7465与Colin Dinney博士联系，或致电713-792-8591与David McConkey博士联系。

OncoLog ，2015年8月，第60卷，第8期